期刊简介
中华医学会主办。本刊为中文核心期刊和中国科技论文统计源期刊，被美国《化学文摘》、日本科学技术情报中心（JICST）以及中国科学引文数据库等多家国内外数据库收录；以传播视网膜、葡萄膜、玻璃体、视神经疾病等学科专业临床与基础研究最新成果为己任，推动眼底病事业进步，做眼底病同仁的朋友。
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首页>中华眼底病杂志
- 杂志名称：中华眼底病杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1005-1015
- 国内刊号：51-1434/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：1997看中国科协优秀科技期刊三等奖期刊收录：万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏
G蛋白偶联受体91对早期糖尿病大鼠血视网膜屏障的影响及机制
胡健艳；李婷婷；吴强
关键词：糖尿病视网膜病变/病理生理学, RNA, 小分子干扰, 受体, G-蛋白偶联, 血管内皮生长因子类, p38丝裂原活化蛋白激酶类, 动物实验
摘要：目的 观察G蛋白偶联受体91(GPR91)对早期糖尿病大鼠血视网膜屏障(BRB)的影响及可能的作用机制.方法 构建GPR91小发夹RNA(shRNA)慢病毒载体pGCSIL-GFP-shGPR91及相应的慢病毒空载体pGCSIL-GFP-shScrambled.健康雄性Sprague-Dawley大鼠60只,随机分为对照组(A组)、糖尿病链脲佐菌素(STZ)组(B组)、空病毒LV.shScrambled组(C组)、病毒LV.shGPR91组(D组),每组均为15只大鼠.大鼠STZ腹腔注射2周后,C组大鼠玻璃体腔注射浓度为1×108 TU/ml的空载体病毒1μl;D组大鼠玻璃体腔注射浓度为1×108 TU/ml的pGCSIL-GFP-shGPR91慢病毒1 μl.注射后12周,免疫组织化学染色和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠视网膜中GPR91及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的表达和激活情况.苏木精-伊红染色和伊凡思蓝(EB)渗漏试验观察大鼠视网膜微血管结构改变和渗漏情况.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测视网膜中血管内皮生长因子(VEGF)表达情况.结果 免疫组织化学染色可见GPR91主要表达于大鼠视网膜神经节细胞层;Western blot检测结果显示,D组GPR91表达较C组显著降低,差异有统计学意义(F=39.31,P＜0.01).光学显微镜观察发现,B、C组大鼠视网膜内层毛细血管较A组大鼠视网膜内层毛细血管明显扩张,D组大鼠视网膜内层扩张的毛细血管显著改善.EB渗漏试验结果显示,D组大鼠视网膜EB渗漏量较C组下降(33.8±4.11)％,差异有统计学意义(F=30.35,P＜0.05).ELISA检测结果显示,B、C组大鼠视网膜VEGF蛋白表达较A组明显增加;D组大鼠视网膜VEGF蛋白表达较C组显著下降,差异有统计学意义(F=253.15,P＜0.05).Westernblot检测结果显示,B组大鼠视网膜细胞外信号调节激酶(ERK) 1/2、c-jun氨基末端激酶、p38 MAPK通路均激活,B组各比值与A组比较,差异有统计学意义(q=6.38、2.94、3.45,P＜0.05).D组中p-ERK1/2与t-ERK1/2的比值较C组显著降低,差异有统计学意义(F=22.50,P＜0.05).结论 GPR91受体shRNA玻璃体腔注射可改善早期糖尿病大鼠视网膜BRB损伤;GPRg1受体可能通过激活ERK1/2信号通路参与调控早期糖尿病视网膜中VEGF的表达及BRB的损伤.
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